从核酸提取到qPCR：如何构建更稳定、更高效的分子质控流程？

938 人阅读发布时间：2026-08-27 15:36

随着细胞与基因治疗（CGT）、病毒载体、mRNA等创新生物药快速发展，产品研发与生产过程中的质量控制也面临更高要求。面对复杂样本和多样化检测需求，检测方法不仅需要具备高灵敏度、高特异性和定量能力，还需要兼顾检测效率、结果重复性和流程标准化。以核酸扩增为基础的qPCR技术，凭借灵敏度高、特异性强、定量能力突出等优势，已成为多个生物制品分子质量控制场景中的重要检测技术。

根据CGT相关质量控制法规要求，需要对支原体、工艺相关残留DNA等关键质量指标进行有效控制和监测；基于NAT/qPCR的检测技术也广泛应用于部分微生物及核酸相关检测场景。然而，对于基于核酸扩增的检测而言，qPCR并不是整个检测流程的全部。

从样品进入实验室，到最终获得检测结果，通常还需要经历核酸提取、纯化、扩增检测及数据分析等多个环节。其中，核酸提取是连接样品与下游PCR检测的重要前处理步骤。提取效率、核酸回收率、纯度以及人为操作差异，都可能影响进入PCR体系的模板质量，并进一步影响最终检测结果。因此，稳定可靠的分子检测，不仅需要优化PCR反应本身，也需要关注前端核酸提取。

核酸提取：从“实验步骤”到关键质量控制环节

核酸提取的核心并不仅是“获得核酸”，还需要从复杂样本中有效回收目标核酸，并尽可能去除蛋白质、盐离子及其他可能干扰下游扩增反应的物质，从而获得适用于后续检测的核酸模板。以磁珠法为例，通过调节核酸与磁珠的结合、洗涤及洗脱条件，可以实现核酸的分离与纯化。对于残留DNA等低丰度目标而言，稳定的前处理流程尤为重要，因为提取过程中的回收效率和操作差异可能进一步影响后续定量检测的准确性和重复性。因此，核酸提取并不是简单的实验准备步骤，而是分子检测流程中影响结果稳定性的重要环节。

手工提取：灵活，但标准化面临挑战

传统手工核酸提取通常涉及加样、裂解、结合、洗涤、洗脱等多个操作步骤。在样本量较小时，手工方式具有一定灵活性；但随着检测批次和样本数量增加，其局限性也逐渐显现：

操作步骤多，人工干预环节多；
不同人员之间存在操作差异；
批量样本处理效率有限；
移液、混匀等操作可能影响提取一致性；
样本量增加后，人力投入和操作时间同步增加。

对于需要长期开展、批量执行的QC检测而言，如何降低人为操作带来的变异、提升流程一致性，成为核酸提取环节进一步优化的重要方向。

自动化提取：让核酸提取更稳定、更标准

自动化核酸提取的价值并不只是“更快”。通过将关键提取步骤由仪器按照预设程序执行，可以减少人工干预，降低操作差异，并支持多样本批量处理，从而推动核酸提取流程向标准化、自动化和可重复方向发展。尤其是在QC实验室中，当核酸提取与后续qPCR检测形成稳定衔接后，自动化可以进一步减少不同人员、不同批次之间的操作差异，使整个检测流程更加规范。因此，从手工提取走向自动化，并不是简单地替换一个实验步骤，而是对整个分子检测流程进行优化。

从核酸提取到qPCR，助力构建完整分子质控解决方案

分子质量控制关注的不仅是检测本身，更是从样品前处理、核酸提取、纯化到qPCR检测及结果分析的完整Workflow。只有各环节协同优化，才能为分子检测提供稳定、可靠且可重复的结果。

基于以上需求，ACROBiosystems百普赛斯构建了覆盖自动化核酸提取设备、磁珠法核酸提取试剂及qPCR检测试剂的分子质量控制解决方案，实现从样品前处理到分子检测的流程衔接。自动化核酸提取设备配合磁珠法核酸提取试剂，可完成标准化核酸提取与纯化；结合覆盖多类检测需求的qPCR试剂盒，实现目标核酸的定性或定量分析，帮助QC实验室提升流程一致性和批量检测效率。

核酸提取及检测流程示意图(以无菌检测为例)

目前，ACROBiosystems百普赛斯分子检测产品可覆盖宿主细胞残留DNA、质粒DNA、风险元件E1A & SV40LTA、支原体、无菌等多项质控检测场景，并可根据不同检测需求匹配相应的核酸提取流程。此外，我们的部分产品经Eurofins第三方方法验证，为方法性能和检测结果的可靠性提供进一步支持。