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经SPR/BLI验证天然结合活性的新冠病毒蛋白上线!—ACROBiosystems

发布时间:2020-03-06 18:07 |  点击次数:

从2019年12月疫情爆出发展至今,国内的形势呈现好转态势,新增确诊病例大幅度的下降,但国外近期却不容乐观,频频爆出感染人数的增加,截止3月3日,下午2点,海外确诊人数10449个。韩国、意大利、伊朗、日本、西班牙等国先后沦为重灾区。


图片来自网络

 

快速研发出有效阻止新型冠状病毒入侵人体细胞的抗病毒药物是重中之重,那么新型冠状病毒是怎么入侵人体细胞的呢?

 

『如果把人体想象成一间房屋,把新冠病毒想象成强盗,那么,ACE2就是这间房屋的‘门把手’;S蛋白抓住了它,病毒从而长驱直入闯进人体细胞。——西湖大学特聘研究员陶亮

 

2019新型冠状病毒(2019-nCoV)通过S蛋白(表面刺突蛋白)来附着并侵入宿主细胞,S蛋白包括S1和S2两个亚基,其中S1亚基上的RBD位点可以与人体肺部细胞表面的ACE2(血管紧张素转换酶2)结合,使病毒膜与宿主细胞膜融合而完成入侵过程(1,2),因此,S蛋白和S1蛋白是抗新冠病毒治疗药物开发的重要靶点蛋白。

在日益严峻的情况下,蛋白本身的质量水平为影响抗病毒药物开发的重要因素,当前市面上绝大部分新冠病毒靶点蛋白产品都没有经过系统的活性验证,在实际应用过程中极易造成不确定性,不利于抗病毒药物的快速开发和筛选。

 

ACROBiosystems基于HEK293的人源细胞表达平台开发出了高质量的Human ACE2蛋白及病毒SS1蛋白,蛋白产品经过基于BiacoreForteBio Octet平台SPR和BLI技术进行了动力学表征和亲和力严格验证,确认其天然结合活性,质量保障助力药物研发。

 

有高质量的蛋白还不够,ACRO还特提供以下福利:
 

福利
  • SPR/BLI/ELISA活性验证实验Protocol免费提供
  • ACE2, S, S1蛋白买大包装送小包装(数量有限,先到先得)
  • 免费提供新冠病毒亲和力服务检测
  • 1)如果您提供芯片和试剂,ACRO可免费提供检测服务;2)如果需要ACRO提供芯片和试剂,ACRO提供检测服务费5折优惠。
  • *目前实验排期优先满足抗疫需要,提出需求次日即可开启实验
  • 干冰运输免运费(液体发货的相关蛋白产品)

 

活性验证数据之SPR

Human ACE2蛋白与2019-nCoV S1蛋白的亲和力常数为15.4 nM。


Fig.1 2019-nCoV S1 protein, His Tag (Cat. No.S1N-C52H3) captured on CM5 Chip via anti-His antibody can bind Human ACE2 Protein, Fc Tag (Cat. No. AC2-H5257) with an affinity constant of 15.4 nM as determined in SPR assay (Biacore 8K) .

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活性验证数据之BLI

Human ACE2蛋白与全长S蛋白的亲和常数为17. 2nM,与文献报道高度一致(2,3)

Fig.2 Loaded Human ACE-2 protein, C-Fc (Cat. No. AC2-H5257) on Protein A Biosensor, can bind 2019-nCoV S protein Full Length (R683A, R685A), His Tag (Cat. No. SPN-C52H4) with an affinity constant of 17.2 nM as determined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) (Routinely tested).

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活性验证数据之ELISA

Human ACE2蛋白与生物素标记的2019-nCoV S1蛋白结合的EC50达0.109 nM,表明产品具有正确的天然蛋白构象,展现出非常好的生物学活性。

Fig.3 Immobilized Biotinylated 2019-nCoV S1 protein, His, Avi Tag (Cat. No. S1N-C82E8) at 1 μg/mL (100 μL/well) on streptavidin precoated (0.5 μg SA/well) plate, can bind Human ACE2 / ACEH Protein, Fc Tag (Cat. No. AC2-H5257) with a linear range of 0.24-15.62 ng/mL.

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产品列表

(目前前四个产品在线销售,欢迎直接采购!

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参考资料:

1. Jiahua H. et al., Molecular mechanism of evolution and human infection with the novel coronavirus (2019-nCoV). BioRxiv. 2020. 

DOI: https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952903

2. Daniel W. et al., Cryo-EM structure of the 2019-nCoV spike in the prefusion conformation. Science. 2020.

DOI: 10.1126/science.abb2507

3.Xiaolong T. et al., Potent binding of 2019 novel coronavirus spike protein by a SARS coronavirus-specific human monoclonal antibody. BioRxiv. 2020.

DOI: https://doi.org/10.1101/2020.01.28.923011