快速搞定ADC内吞检测，加速候选药物筛选进程

对于ADC研发人来说，内吞作用是ADC发挥疗效的核心机制——只有抗体成功识别肿瘤抗原并介导药物内化进入细胞，细胞毒性载荷才能精准释放，实现“靶向杀伤”。因此，内吞检测不仅是候选抗体筛选的关键关口，更是优化药物结构、保障临床疗效的核心环节。

但实际研发中，不少人都经历内吞检测痛点：背景信号干扰强、检测步骤繁琐耗时、试剂影响抗原结合活性……这些问题不仅导致检测结果不准，更拖慢了候选药物的筛选节奏！

ACROBiosystems百普赛斯针对性推出pH敏感型内吞检测试剂（Cat. No.IGG-PZF2001），以创新设计打破检测困境，用极简流程实现高效精准检测，让候选药物筛选效率直接翻倍！

无需复杂预处理，最快10分钟即可完成标记：

1. 标记抗体：将ADC内吞检测试剂与待检测抗体/ADC在室温下共孵育10min形成标记复合物，无需对抗体进行额外标记，直接简化前期准备工作；

2. 孵育：将靶细胞与标记复合物在 37℃条件下孵育2小时。试剂采用pH敏感荧光染料标记Fab片段，仅特异性结合待测抗体的Fc部分，不占用抗原结合位点，同时仅在细胞内酸性环境中激活荧光信号，胞外中性环境下几乎无信号干扰；

3. 结果分析：清洗后通过流式细胞术（FACS）定量分析内吞效率，无需繁琐步骤，直接读取清晰结果。

抗体内化检测试剂原理图

 

本试剂已通过严格的实验验证，数据表现亮眼：

在SK-BR-3细胞+抗HER2抗体、Raji细胞+抗CD20抗体的实验中，此ADC内吞检测试剂能清晰区分特异性内吞信号与同型对照信号，阳性检出率显著高于对照组。

图1 抗体内吞作用的流式细胞术（FACS）分析：A. HER2 阳性细胞系中 HER2 特异性抗体曲妥珠单抗（红色）的检测结果B. CD20 阳性细胞系中 CD20 特异性抗体利妥昔单抗（红色）的检测结果。蓝色：IgG1 同型对照抗体的检测结果

为确定最佳工作浓度，我们在 CD20 阳性和 HER2 阳性细胞系中对该内吞作用检测试剂进行了系统性评估：将一抗浓度固定为 2 µg/mL后，通过综合的信噪比分析，我们发现在这两种细胞系中，1: 2 的比例（即 1 µg/mL检测试剂与 2 µg/mL抗体搭配）能够在检测灵敏度与背景信号抑制之间实现最佳平衡（图 2 A-D）。这一优化后的条件为后续的内吞作用检测实验建立了一套可靠且经济高效的实验方案供您参考。

图2 不同检测试剂浓度下抗体内吞作用的流式细胞术（FACS）分析。A. CD20 阳性细胞系中的检测试剂对照组；B. CD20 阳性细胞系中检测试剂与 CD20 特异性抗体利妥昔单抗（Rituximab）共孵育组；空白组（Blank）：仅含细胞；红色（Red）：1 μg/mL检测试剂；蓝色（Blue）：2 μg/mL检测试剂；紫色（Purple）：4 μg/mL检测试剂；C. HER2 阳性细胞系中的检测试剂对照组；D. HER2 阳性细胞系中检测试剂与 HER2 特异性抗体曲妥珠单抗（Trastuzumab）共孵育组；空白组（Blank）：仅含细胞；红色（Red）：1 μg/mL检测试剂；蓝色（Blue）：2 μg/mL检测试剂；绿色（Green）：4 μg/mL检测试剂

此外，该内吞检测试剂也支持细胞成像方法验证：与溶酶体标记探针共定位显示，试剂能精准追踪抗体内吞后的胞内转运路径，荧光信号清晰可辨，为内吞机制研究提供直观证据。

图3 A. 内吞作用检测试剂（货号：IGG-PZF2001）B. IgG1 同型对照抗体 - 内吞作用检测试剂偶联物C. 抗 HER2 抗体 - 内吞作用检测试剂偶联物D. 抗 HER2 抗体 - 内吞作用检测试剂偶联物（Z 轴堆叠扫描成像）

> 高信噪比+低背景干扰：pH敏感特性让荧光信号仅在细胞内激活，有效规避胞外背景干扰，阳性信号强、分辨率高，轻松区分不同内吞水平的候选药物，检测结果更可靠；

> 不影响抗原结合活性：试剂靶向结合抗体Fc端，避开抗原结合位点，完美保留抗体与肿瘤抗原的结合能力，确保检测结果真实反映抗体本身的内吞活性；

> 操作极速便捷：仅需10分钟即可形成稳定的标记复合物，后续孵育、检测流程简单，大幅节省实验时间；

> 兼容性拉满+适配全阶段：适配贴壁细胞、悬浮细胞等多种细胞模型，同时支持流式定量分析与细胞成像定性观察，既能满足抗体发现阶段的高通量筛选，也能用于药物优化、临床前开发及作用机制研究；

作为ADC研发的核心支撑工具，内吞检测的准确性与效率直接影响项目推进节奏。ACROBiosystems百普赛斯的ADC内吞检测试剂，以“精准、便捷、高效”的核心优势，已成为众多药企和科研机构的优选工具，助力您快速锁定高活性候选分子。