随着科学研究的不断深入，3D细胞培养的优势日益突出，越来越多的科研工作者将3D细胞培养系统应用于肿瘤生长、药物研发、组织修复/再生以及疾病模型等。与体内系统相比，3D细胞培养系统在时间和成本上更具有优势，且更加有望于转化到临床。

然而，寻找到合适的基质胶产品并正确使用是推进研究的第一步！

特此我们为您收集整理了有关基质胶产品的问题，并为您作出解答~

 

Q1如此多版本的基质胶该如何选择？

A: 

 

Q2实验前需要提前多久解冻基质胶？

A: 以标准型基质胶为例，对于全新未拆封产品，冷冻状态下基质胶可在使用前一天埋于冰中转移至2-8℃环境，次日使用；或者在操作前4h暴露于4℃环境解冻，立刻使用；对于已经封装好的基质胶（500 μL为例），冷冻基质胶在使用前30min于4℃环境下解冻即可使用。
 

Q3基质胶最低凝胶限度？

A: 建议使用时稀释浓度不低于4mg/mL，并保证基质胶完全溶解于稀释体系中。
 

Q4基质胶铺板时如何判断基质胶是否已经凝固并可进行下一步操作？

A: 标准型浓度的基质胶（8-13mg/mL）的凝胶时间约为20-30 分钟，而高浓度型基质胶（16-26mg/mL）凝胶时间约为3分钟，37℃环境孵育并确保凝胶时间充足的条件下，可观察到基质胶在底层形成薄层凝胶，即可判断基质胶已经凝固。

 

Q5进行一次侵袭实验需要准备多少基质胶呢？

A: 对于24孔板的Transwell小室，建议使用将标准浓度进行1:8稀释后，以60 μL稀释液进行铺胶；我们对于标准型基质胶Matrigengel Matrix (Acro Certified)(Cat.No. AC-M082704)和Matrigengel Matrix (Phenol Red Free) (Acro Certified) (Cat.No. AC-M082706)都进行了侵袭验证，同时提供了不同稀释比例（1:6和1:4）的肿瘤细胞侵袭效果，可作为实验参考。

经验证，以不同浓度标准型基质胶(Cat. No. AC-M082704)作用24h后，检测到5×10⁴ SGC-7901的侵袭，且随着基质胶浓度的增 加，成功侵袭的细胞数明显减少。

经验证，以不同浓度标准型无酚红基质胶(Cat.No. AC-M082706)作用24h后，检测到5×10⁴ SGC-7901的侵袭，且随着基质胶浓度的增加，成功侵袭的细胞数明显减少。

 

Q62D贴壁细胞培养需要用到基质胶吗？

A: 2D贴壁细胞也可以用，基质胶是可以促进细胞贴壁的，尤其是iPSC。

 

Q7基质胶能够诱导ES/iPSC细胞分化吗？

A: 诱导分化不取决于基质胶，这是由培养基定向分化完成的。Matrigengel Matrix IPSC Level(Acro Certified)(Cat.No. AC-M082777)可以维持干细胞培养，并保持干性，有利于后续定向分化。

 

Q8类器官长得越大越好吗？

A: 不是的，类器官培养过程中需要观察生长尺寸，并通过传代等方式控制。由于类器官内部缺乏循环系统，当类器官尺寸较大时，靠近中心的细胞难以和外界进行氧气和营养成分的交换，容易引起凋亡，不利于后续检测。

 

Q9培养的类器官可以传多少代？

A: 一般情况下实现稳定传代可以维持至少3代以上的扩增，部分类器官可实现10次以上扩增，且多次传代后仍然可以保留原有形态。

经验证，低因子无酚红基质胶(Cat. No. AC-M082703)和类器官培养版本基质胶(Cat. No. AC-M082755)可维持类器官传代的稳定性，与C公司同类产品效果相当。小鼠小肠类器官长期扩增超过7代，均维持典型类器官出芽形态。

经对比验证，低因子无酚红基质胶(Cat. No. AC-M082703)和C公司的同类产品均可维持人胃癌类器官生长。连续传至三代观察发现，特征一致，均呈典型囊泡样结构。

 

Q10体内成瘤推荐哪一款基质胶？

A: 推荐使用Matrigengel Matrix (HC) (Acro Certified)(Cat. No. AC-M082724), 经体内成瘤实验验证,能显著促进裸鼠皮下肿瘤增殖。

经体内成瘤实验验证，与对照组和C公司同类产品相比，不同批次的高浓度基质胶(Cat. No. AC-M082724)能显著促进裸鼠皮下肿瘤增殖。

 

Q11在混合基质胶的体内成瘤实验中，从注射到形成较为明显的肿瘤需要多久？

A: 一般来说，注射后一周基质胶基本被吸收了，大概一周左右会开始形成明显的肿瘤，不同细胞时间不一样，注射细胞量不一样时间也不一样。

 

Q12做血管生成实验，使用标准型基质胶还需稀释吗？以及不同规格培养板基质胶的铺板体积是多少？

A: 可以稀释基质胶，按照基质胶：培养基=2：1的比例进行稀释；铺板体积可参照表1进行。

 

Q13在血管生成实验中，如何把握观察结果的时间？

A: 成管时间与细胞状态密切相关。细胞状态好时，2-3小时开始成管；细胞状态较差时，可能18-24h成管；如果使用原代内皮细胞而非永生化细胞，开始成管的时间会延迟几个小时。建议首次实验时，每4小时观察一次。

 

Q14Matrigengel Matrix (GFR Phenol Red Free) (Acro Certified)（Cat. No. AC-M082703）里面Collagen IV, laminin, entactin的浓度范围各是多少？如何保证这个浓度的批次稳定呢？

A: 这三者占比分别为laminin 为60%，Collagen IV 30%,entactin 8%。对于不同批次基质胶产品各个蛋白组分含量的情况，我们都有蛋白SDS-PAGE电泳图作为验证，如果需要可以提供。

 

Q15基质胶蛋白浓度一般在8-13mg/mL，如何控制批次间差异？

A: 天然提取的基质胶蛋白会存在一定批间差，实际得到的一般都是10mg/mL左右，基质胶产品的COA中会体现具体浓度。

 

 

以上的问答是否解决了您对于基质胶的疑问吗？

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