LGR5：让单靶ADC受挫的肿瘤干细胞靶点，为何成了双抗ADC的新战场？

2026年AACR年会上，一个数字让LGR5再次受到关注。

摘要4402报告，在EGFR、LGR5双表达的CRC细胞系中，EGFR×LGR5 双抗ADC（bsADC）相较于使用相同linker-payload的LGR5单靶ADC，体外效力高出100–1000倍。这个比较指向特定细胞模型中的效力差异，并不等于临床疗效提升。摘要还报告，单靶LGR5 ADC 8E11-CPT2采用位点特异性偶联，并在免疫健全小鼠中耐受良好。

AACR会后，团队于2026年6月发布相关bioRxiv预印本，进一步报告bsADC在部分CRC异种移植模型中的体内活性；这些结果仍需同行评审和更多研究验证。

这个结果把一个老问题重新推到了台前：LGR5明明适合被靶向，为什么单靶策略仍要面对表达变化、复发和载荷选择等挑战？

LGR5（GPR49）是A类GPCR，具有七次跨膜结构域和较大的胞外区。正常肠道中，LGR5标记隐窝底部的柱状细胞（CBC）群体，是肠上皮更新的重要成体干细胞群之一。作为R-spondin受体家族成员，LGR5可参与R-spondin对Wnt/β-catenin信号的增强。

Barker等人通过谱系追踪证明，LGR5阳性隐窝细胞能够自我更新并产生不同肠上皮细胞；他们在小鼠模型中进一步显示，在Lgr5阳性干细胞中敲除Apc可启动腺瘤形成。这些研究使LGR5与肠道干细胞及肿瘤起始之间的联系受到广泛关注，也推动它成为肿瘤干细胞研究中的重要分子。

LGR5阳性标记肠道干细胞（ISCs），其位于肠隐窝底部、潘氏细胞之间（High P, et al. Trends Cancer, 2026, 12: 495–509.）

更受ADC开发者看重的是它的内吞特性。LGR5可在无配体条件下持续内吞并进入溶酶体降解通路，为其作为ADC递送靶点提供了生物学依据；但内吞本身并不保证载荷有效释放或产生持久疗效。

因此，LGR5的靶向价值已有多项研究支持，但如何将这种靶点依据转化为持久有效的治疗策略，仍是待解问题。一个关键难点，是肿瘤细胞的LGR5表达状态并非固定不变。

LGR5的表达不是一枚固定贴在细胞上的标签。

Fumagalli等人在Cell Stem Cell发表的谱系追踪显示，循环中的播散肿瘤细胞多数为Lgr5阴性，而远端转移灶可出现Lgr5阳性细胞。Shimokawa等人的研究表明，在人CRC类器官移植瘤中选择性清除LGR5阳性细胞后，肿瘤明显缩小；但一旦停止清除，部分分化肿瘤细胞也能重新表达LGR5，并参与肿瘤再生。这些研究说明LGR5阳性与阴性状态在特定模型中可以转换。

因此，研究LGR5靶向策略时，不仅要问“有没有LGR5”，还要关注治疗过程中细胞状态如何变化。High等在2025年发表的研究为这一问题提供了另一条线索：西妥昔单抗（cetuximab，CTX）可在CRC细胞系、类器官和动物模型中提高LGR5表达，这一现象在所研究的模型中不受RAS/PIK3CA突变状态限制；与LGR5-CPT2 ADC联用，在RAS突变PDX中增强了抗肿瘤效果并延长生存。

另一项CRC细胞模型研究发现，LGR5下调或敲除与MET–STAT3信号增强及耐药相关，并伴随Cyclin D1、Bcl-xL等信号变化。这提示特定模型中可能存在代偿通路。

围绕LGR5的开发并不局限于ADC，双抗、PDC和细胞治疗也在探索中。

以 LGR5 为靶点的肿瘤治疗策略概览（High P, et al. Trends Cancer, 2026, 12: 495–509.）

双抗以petosemtamab（MCLA-158）为代表。这是一款EGFR×LGR5双抗，研究报道的作用机制包括阻断EGFR配体结合、促进LGR5阳性细胞中的EGFR内吞与降解，以及通过Fc介导ADCC/ADCP。该项目已进入复发或转移性头颈鳞癌的III期研究。

AACR 4402报告的EGFR×LGR5 bsADC则在双抗基础上连接了细胞毒载荷CPT2。其100–1000倍效力差异来自特定双表达CRC细胞系中的体外比较；后续预印本增加了异种移植模型数据。它为双靶设计提供了值得继续验证的线索，但目前不能据此判断其已克服表达状态转换或复发。

Petosemtamab的作用机制及临床开发进展。

另一条路线是肽抗体偶联物（peptibody-drug conjugate）。研究者利用RSPO4来源的furin结构域构建靶向部分，可识别LGR4、LGR5和LGR6，并连接细胞毒载荷。目前这类策略仍主要处于临床前研究阶段。

细胞治疗则尝试借助免疫细胞的杀伤能力识别LGR5。Carina Biotech的CNA3103是靶向LGR5的自体CAR-T，已在转移性CRC开展1/2a期研究；LGR5×CD3 T细胞衔接器仍处于临床前探索阶段。

从双抗、ADC到PDC和细胞治疗，这些路线拓展了LGR5的靶向方式和效应机制。它们能否覆盖不同表达状态的肿瘤细胞、是否有助于降低复发风险，仍需在各自的模型和临床研究中验证。

LGR5研究工具可按问题分层：重组ECD用于分子结合和配体相关研究；全长LGR5细胞模型用于验证细胞表面识别；具体功能则需根据ADC、双抗或CAR-T等机制选择相应体系。

ACROBiosystems百普赛斯提供人源、鼠源及食蟹猴LGR5重组蛋白、全长人LGR5稳定细胞以及EGFR×LGR5 SRE-Luc报告基因细胞株。该报告细胞读取EGF诱导的EGFR/SRE信号，适用于特定EGFR×LGR5双抗研究。

从分子结合、细胞表面识别到机制相关功能验证，按研究问题逐层选择工具，才能让不同类型的LGR5靶向研究获得相匹配的实验依据。

Cynomolgus LGR5, His Tag (Cat. No. LG5-C52H7) on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.

Immobilized Human R-Spondin 1, His Tag (Cat. No. RS1-H4221) at 5 μg/mL (100 μL/well) can bind Human LGR5 protein, Fc Tag (Cat. No. LG5-H5253) with a linear range of 0.3-10 ng/mL (QC tested).

Immobilized Cynomolgus LGR5, His Tag (Cat. No. LG5-C52H7) at 5 μg/mL (100 μL/well) can bind Human R-Spondin 1 (21-146), Fc Tag (Cat. No. RS1-H5269) with a linear range of 0.2-5 ng/mL (QC tested).

Immobilized Petosemtamab at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Biotinylated Human LGR5 (22-561) Protein, His,Avitag (Cat. No. LG5-H82E4) with a linear range of 0.1-8 ng/mL (Routinely tested).

Human R-Spondin 3 (22-146), His Tag (Cat. No. RS6-H5222) with immobilized on CM5 Chip can bind Human LGR5, His Tag (Cat. No. LG5-H52H3) with an affinity constant of 18.6 nM as determined in a SPR assay (Biacore 8K) (Routinely tested).

Passage stability analysis of receptor expression by FACS.
 Flow cytometry surface staining of human LGR5 on HEK293/Human LGR5 Stable Cell Line (Cat. No. CHEK-ATP327) demonstrates consistent mean fluorescent intensity across passage 9-24.