GMP级

为更好满足高盐环境对全能核酸酶的活性要求，ACROBiosystems百普赛斯依托酶改造技术平台，通过协同AI模拟计算和高通量筛选，自主开发出GMP级别耐高盐版本全能核酸酶GMP Salt Active GENIUS™Nuclease（货号：GMP-NUES13），在0-500mM NaCl条件下，均能保持高酶活，是生物药工艺流程中去除核酸污染的理想选择！

 

随着生物医药行业的快速发展，越来越多的生物制品开始服务于人类健康，治疗性抗体药物、细胞治疗、病毒载体疫苗等需求日益庞大。不同于传统口服类药物，大量生物制品通过注射等给药方式直接进入体内，因此更需要严格的质量监管来保证生物制品的安全性和有效性。宿主核酸的残留因其可能带来的传染性或者致瘤的风险而被作为生物制品安全监管中的重要一项。WHO及世界各国对宿主核酸的残留都有严格的规定，如疫苗及治疗类生物制品的DNA残留量通常控制在100pg/剂量以下，部分产品甚至要求DNA残留量不高于10pg/剂量。因此，解决宿主核酸的残留是生物制品生产过程中必须面对的问题。

全能核酸酶是一种来源于SerratiaMarcescen的基因工程酶，它可以降解所有形式的DNA和RNA，包括单链、双链、线状、环状、天然以及变性的核酸，将它们消化成3-5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸，且不具有碱基识别特异性。因此，在一些药物的生产工艺中常使用全能核酸酶去除残留核酸，如能有效去除疫苗样品、细胞和基因治疗病毒样品及重组蛋白药物中的核酸污染，降低核酸残留毒性风险，提高产品安全性；另外，在蛋白分析样品制备、改善重组蛋白纯化工艺、提高蛋白产量、细胞冻存等方面也可通过使用全能核酸酶处理核酸来达到理想实验效果。

 

基于此，常使用全能核酸酶应用于药物开发生产工艺流程中来去除核酸污染。如在AAV病毒生产中，经宿主细胞大量扩增，在细胞裂解后，往往需要加入全能核酸酶来去除核酸污染，同时可以降低粘样品粘稠度，便于后续上柱纯化。但在此过程中，盐是各种纯化方案的重要组成部分，盐浓度的提高可有效地减少AAV病毒颗粒的聚集，提高AAV病毒颗粒产率。因此常使用含有较高盐浓度的buffer（400-500mM）来提高病毒收率，而常规版本全能核酸酶的酶活会随着盐浓度升高而急剧下降，实际使用中，常需要通过增加酶的用量或延长孵育时间来提高纯化效果，但这无疑增加了成本和工艺复杂度。

    酶改造技术平台

ACROBiosystems百普赛斯通过协同AI计算和模拟的“干实验”与高通量的“湿实验”，将AI技术与基于力场的计算机虚拟筛选方法结合并应用到蛋白质改造和生产过程中，不断闭环迭代，从而最终得到含有多位点突变的高性能突变体——首先借助AI技术对蛋白质体系进行大规模、高通量的突变预测，得到备选的突变位点与突变方式；然后基于蛋白质力场的计算机虚拟筛选方法，重点考量酶结构与功能的对应关系，将AI方法得到的备选方案缩小;进一步再进行分子动力学模拟的效果验证与筛选，模拟酶在应用场景下的动力学行为，进行优中选优，得到最终的待实验突变体，最后进行相关实验性能验证，提高酶改造的效率。

 

产品特色

• 中、高盐条件下，具有高酶活；

• 稳定性高，37°C保存21天，酶活不受影响；

• 高盐条件下可减少AAV颗粒聚集，提高病毒收率；

• 下游工艺无需透析、脱盐，节省时间；

• GMP条件生产，满足从研发到生产的大规模使用需求。

 

验证数据

• GMP Salt Active GENIUS™Nuclease（货号：GMP-NUES13）的高酶活性能

ACRO GMP Salt Active GENIUS™Nuclease在0-500mM NaCl条件下，均能保持高酶活；且0-400mM条件下GMP-NUES13的酶活显著优于竞品。

• 高保存稳定性

37℃保存21天后，GMP Salt Active GENIUS™Nuclease酶活不受影响。

• 批间一致性

经验证，不同批次的GMP Salt Active GENIUS™Nuclease酶活性可保持一致，具有高批间一致性，以确保长期工艺生产使用的稳定性和可靠性。

• HEK293细胞中使用GMP Salt Active GENIUS™Nuclease处理后的DNA残留

对6.5E+06cell/mL HEK293的细胞破碎液，使用40U/mL耐盐核酸酶处理30min后再利用qPCR检测宿主细胞DNA残留量，结果显示ACRO GMP Salt Active GENIUS™Nuclease GMP-NUES13处理后可DNA残留极低，核酸清除效果优于竞品。

   

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Cat. No.	Product   Description
GMP-NUES13	GMP Salt Active GENIUS™ Nuclease
GMP-NUES19	GMP GENIUS™ Nuclease
NUE-S5119	GENIUS™ Nuclease, premium grade
NUE-S5117	Salt Active GENIUS™ Nuclease, premium grade
BEE-N3116	GENIUS™Nuclease DMF Filed
CRS-A016	resDetect™  GENIUS™ Nuclease ELISA Kit (Residue Testing)